Pi lwil oliv Saposhnikovia divaricata pou chandèl ak savon fè wholesale diffuser lwil esansyèl nouvo pou diffusers wozo brûler
deskripsyon kout:
2.1. Preparasyon pou SDE
Rizòm SD yo te achte kòm yon zèb sèk nan Hanherb Co (Guri, Kore di). Doktè Go-Ya Choi nan Korea Institute of Oriental Medicine (KIOM) te konfime materyèl plant yo taksonomik. Yo te depoze yon echantiyon bon (nimewo 2014 SDE-6) nan èrbyòm Koreyen Resous Èrb Estanda. Rizòm sèk nan SD (320 g) yo te ekstrè de fwa ak etanòl 70% (ak yon rflu 2 h) epi yo te ekstrè a Lè sa a, konsantre anba presyon redwi. Dekoksyon an te filtre, lyofilize, epi estoke nan 4 ° C. Sede a nan ekstrè sèk soti nan materyèl kòmanse brit te 48.13% (w / w).
Te analiz kwomatografik fèt ak yon sistèm HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) ak yon detektè fotodyode etalaj. Pou analiz HPLC nan SDE, prim-O-Glukosylcimifugin estanda te achte nan men Enstiti Kore di Pwomosyon pou endistri Medsin Tradisyonèl (Gyeongsan, Kore di), aksec-O-glucosylhamaudol ak 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol yo te izole nan laboratwa nou an ak idantifye pa analiz espèk, prensipalman pa RMN ak MS.
Echantiyon SDE (0.1 mg) yo te fonn nan 70% etanòl (10 mL). Separasyon kwomatografik yo te fèt ak yon kolòn XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co, Milford, MA, USA). Faz mobil la fèt ak asetonitrile (A) ak 0.1% asid acetic nan dlo (B) nan yon pousantaj koule nan 1.0 mL / min. Yo te itilize yon pwogram gradyan plizyè etap jan sa a: 5% A (0 min), 5-20% A (0-10 min), 20% A (10-23 min), ak 20-65% A (23-40 min). ). Longèdonn deteksyon an te tcheke nan 210-400 nm epi anrejistre nan 254 nm. Volim piki a te 10.0μL. Yo te prepare solisyon estanda pou detèminasyon twa kwomon nan yon konsantrasyon final 7.781 mg/mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31.125 mg/mL (4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisaminol), ak 31.125 mg/mL (sec-O-glucosylhamaudol) nan metanol epi kenbe nan 4 ° C.
2.3. Evalyasyon aktivite anti-enflamatwaIn vitro
2.3.1. Kilti Selil ak Egzanp Tretman
Selil RAW 264.7 yo te jwenn nan American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) epi yo te grandi nan mwayen DMEM ki gen 1% antibyotik ak 5.5% FBS. Selil yo te enkube nan yon atmosfè imidite 5% CO2 nan 37 ° C. Pou ankouraje selil yo, yo te ranplase mwayen an ak mwayen DMEM fre, ak lipopolisakarid (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) nan 1.μg/mL te ajoute nan prezans oswa absans SDE (200 oswa 400μg/mL) pou yon lòt 24 èdtan.
Selil yo te trete ak SDE ak ankouraje ak LPS pou 24 èdtan. Okenn pwodiksyon pa te analize nan mezire nitrite lè l sèvi avèk reyaktif Griess la dapre yon etid anvan [12]. Sekresyon nan sitokin enflamatwa PGE2, TNF-α, epi IL-6 te detèmine lè l sèvi avèk yon twous ELISA (sistèm R&D) dapre enstriksyon manifakti yo. Efè SDE sou pwodiksyon NO ak cytokine yo te detèmine nan 540 nm oswa 450 nm lè l sèvi avèk yon Wallac EnVision.™lektè microplate (PerkinElmer).
2.4. Evalyasyon nan aktivite antiosteoartritiIn Vivo
2.4.1. Bèt
Gason rat Sprague-Dawley (7 semèn) te achte nan men Samtako Inc. (Osan, Kore di) epi yo te loje anba kondisyon kontwole ak yon sik limyè/fè nwa 12-h nan°C ak% imidite. Rat yo te bay yon rejim laboratwa ak dload libitum. Tout pwosedi eksperimantal yo te fèt an konfòmite ak direktiv Enstiti Nasyonal Sante yo (NIH) epi yo te apwouve pa Komite Swen ak Itilizasyon Animal nan inivèsite Daejeon (Daejeon, Repiblik Kore di).
2.4.2. Endiksyon OA ak MIA nan rat
Bèt yo te randomize epi yo te asiyen nan gwoup tretman anvan inisyasyon etid la (pou chak gwoup). MIA solisyon (3 mg/50μL nan 0.9% saline) te dirèkteman sou fòm piki nan espas intra-artikulèr nan jenou dwat la anba anestezi pwovoke ak yon melanj de ketamin ak xylazine. Rat yo te divize owaza nan kat gwoup: (1) gwoup saline ki pa gen piki MIA, (2) gwoup MIA ak piki MIA, (3) gwoup SDE trete (200 mg/kg) ak piki MIA, ak (4). ) gwoup indomethacin- (IM-) trete (2 mg/kg) ak piki MIA. Rat yo te administre oralman ak SDE ak IM 1 semèn anvan piki MIA pou 4 semèn. Dòz SDE ak IM yo te itilize nan etid sa a te baze sou sa yo te anplwaye nan etid anvan yo.10,13,14].
2.4.3. Mezi Hindpaw Distribisyon pwa-pote
Apre endiksyon OA, balans orijinal la nan kapasite pwa-pote nan hindpaws te deranje. Yo te itilize yon tèsteur enkapasite (Linton instrumentation, Norfolk, UK) pou evalye chanjman nan tolerans pwa-pote a. Yo te mete rat ak anpil atansyon nan chanm mezi a. Fòs pwa-pote egzèse pa branch dèyè a te fè mwayèn sou yon peryòd 3 s. Rapò distribisyon pwa a te kalkile pa ekwasyon sa a: [pwa sou manm dèyè dwat/(pwa sou manm dèyè dwat + pwa sou manm dèyè gòch)] × 100 [15].
2.4.4. Mezi nan Nivo Serik Cytokine
Echantiyon san yo te santrifuje nan 1,500 g pou 10 min nan 4 ° C; Lè sa a, serom la te kolekte epi estoke nan -70 ° C jiskaske yo itilize. Nivo IL-1β, IL-6, TNF-α, ak PGE2 nan serik la yo te mezire lè l sèvi avèk twous ELISA ki soti nan R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) dapre enstriksyon manifakti.
2.4.5. An tan reyèl Kantitatif RT-PCR analiz
Total RNA te ekstrè nan tisi jwenti jenou lè l sèvi avèk TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), ranvèse transkri nan cDNA epi PCR-anplifye lè l sèvi avèk yon twous TM One Step RT PCR ak SYBR vèt (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, USA). Yo te fè PCR quantitative an tan reyèl lè l sèvi avèk sistèm PCR an tan reyèl Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Sekans primè yo ak sekans sonde yo montre nan Tablo a1. Aliquots nan echantiyon cDNAs ak yon kantite egal GAPDH cDNA yo te anplifye ak TaqMan® Universal PCR melanj mèt ki gen ADN polymerase dapre enstriksyon manifakti (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Kondisyon PCR yo te 2 min nan 50 ° C, 10 min nan 94 ° C, 15 s nan 95 ° C, ak 1 min nan 60 ° C pou 40 sik. Konsantrasyon jèn sib la te detèmine lè l sèvi avèk metòd konparatif Ct (nimewo sik papòt nan pwen kwa ant trase anplifikasyon ak papòt), dapre enstriksyon manifakti a.
Osteoartrit (OA) se twoub miskiloskelèt ki pi souvan ak maladi jwenti dejeneratif ki pi komen nan granmoun aje yo.1]. OA se yon kondisyon ki te koze an pati pa blesi, pèt estrikti ak fonksyon Cartilage, ak disregulasyon nan chemen pro-enflamatwa ak anti-enflamatwa.2,3]. Li prensipalman afekte Cartilage atik ak zo subkondral nan jwenti synovial ak rezilta nan echèk jwenti, ki mennen nan doulè lè yo pote pwa tankou mache ak kanpe.4].
Pa gen gerizon pou OA, paske li trè difisil pou retabli Cartilage a yon fwa li detwi [5]. Objektif tretman yo se soulaje doulè, kenbe oswa amelyore mobilite jwenti, ogmante fòs jwenti yo, epi minimize efè maladi a andikape. Tretman farmakolojik nan OA vize diminye doulè yo nan lòd yo ogmante fonksyon jwenti pasyan an ak kalite lavi. Malgre ke destriksyon Cartilage se evènman prensipal la nan OA, degradasyon kolagen an se ensidan fondamantal ki detèmine pwogresyon irevokabl OA an asosyasyon ak enflamasyon.6,7]. Tretman ak aktivite anti-enflamatwa ak chondroprotective yo espere soulaje doulè ak kenbe entegrite matris nan pasyan OA.
Se poutèt sa, diminye enflamasyon ap gen chans pou benefisye nan jesyon OA. Etid resan yo sijere wòl pwoteksyon pou resous èrbal sou pwogresyon OA, an tèm de bese enflamasyon chondrocyte ak plis destriksyon Cartilage, atravè kapasite yo nan kominike avèk tisi ki asosye ak jwenti, sa ki lakòz diminisyon nan doulè nan jwenti.8].
Rasin lan nanSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) te lajman itilize nan medikaman tradisyonèl pou tretman tèt fè mal, doulè, enflamasyon, ak atrit nan Kore di ak Lachin.9,10]. Efè famasi divès kaliteSaposhnikovia divaricata(SD) gen ladan tou pwopriyete anti-enflamatwa, analgesic, antipiretik, ak antiarthritic [9,11]. Yon etid resan te demontre ke ekstrè SD chromone posede potansyèl efè atrit antirwmatoyid nan yon modèl sourit nan atrit kolagen an pwovoke.10]; sepandan, kèk etid yo te fèt pou sipòte aktivite anti-enflamatwa ak antiatrit nanSaposhnikovia divaricataekstrè (SDE).
Se poutèt sa, etid la prezan envestige aktivite anti-enflamatwa ak antiosteoartriti nan yon ekstrè etanòl 70% nan SD. Premyèman, yo te evalye efè anti-enflamatwa SDEan vitronan LPS-induit RAW 264.7 selil yo. Apre sa, efè antiosteoartriti SDE te mezire lè w evalye distribisyon pwa-pote, degradasyon Cartilage articular, ak repons enflamatwa nan yon modèl rat nan monosodium iodoacetate- (MIA-) pwovoke OA.